pmd19t

pMD19T载体为什么连接不上?

pMD19T载体为什么连接不上？做了两次都是16℃连接了30min，目的片段是1700左右，mix酶带A，第一次配了2微升载体，2微升回收片段，1微升水，平板过夜啥也没长出来；第二次…与T载体连接的目标片段一般是需要A尾（Taq酶扩增），可以看看你用的T载体的说明书，看看对于1700bp左右的片段需要多少ng，浓度太高太

哪个T载体上没有SacI和BamHI这两个酶切位点?

Takara公司的pMD19T simple载体，货号为3271.T-Vector pMD19 (Simple) 是两侧的3’ 端添加了 “T” 的线性化载体，因大部分耐热性DNA聚合...

pMD - 19T是由puc19改造而来的,就是在多克隆位点处插入了一...

外源性基因被导入到LacZ的编码区。当表达时，是从LacZ的起始点开始，所以即使你插入的是完整的序列，也不能表达，因为前面有LacZ的序列。不一定在一个阅读框，就算在，也...

构建表达载体,连的T载转大肠杆菌,但是每次涂板都长了...

如果你用的takara的pmd19T之类的T载体，插入片段需要加A尾的，另pmd19T载体本身2700bp,太大的片段是很难连接上去的。如果你用的是些国产的T...

产生平末端的PCR产物可以进行TA克隆吗对于用高保真Taq...

2 具体的克隆方法,参考所用T载体的说明书.比如TAKARA的pMD-19T,里面有详细的介绍和注意事项.最重要的就是要注意目的片段和载体间的摩尔比要合适(一般3-8:1) 解析看不懂?免费查看...

pmd18t是表达载体吗?如果是,与19t在表达时有什么区别? - 百 ...

不是表达载体。pMD18T和pMD19T都是克隆载体，不是表达载体。表达载体取用pET28系列载体吧。

pmd - 19t载体过期了还可以用吗?

最好不要用了，上面T都没了，很可能出现很多的自连。我们是淼灵生物公司，都是自己做T载体，一般一两个月吧我

连接用了19t,没用simple有影响吗

有影响。pMD19-T-Vector是线性的，必须是3段有A的目的基因片段才可以和pMD19-T-Vector连接，simple是其中之一。

如何快速的筛选克隆?

再补一段，鉴定的时候可以先把细菌挑到96孔板，细菌摇起来以后去PCR鉴定，Takara 的PMD19T里应该有说明书的，里面应该有设计好的引物。1. 载体切完以后多做一步去磷酸化啊，可以很有效地消除自连。2. 如果是较大的片段或特别小的PCR片段，连接体系可以考虑加PEG 4000等，提高连接效率。3. 挑克隆的培养基做